Sıvı Kromatografi-Kütle Spektrometrisi (LC-MS)
Nedir? Sıvı Kromatografisi-Kütle Spektrometresi?
Sıvı kromatografisi-kütle spektrometrisi (LC-MS), sıvı kromatografisinin (veya HPLC) fiziksel ayırma yeteneklerini kütle spektrometrisinin (MS) kütle analiz yetenekleriyle birleştiren bir analitik kimya tekniğidir. Eşleştirilmiş kromatografi-MS sistemleri, her tekniğin bireysel yeteneklerinin sinerjik olarak geliştirilmesi nedeniyle kimyasal analizde popülerdir.
Sıvı kromatografisi, birden fazla bileşene sahip karışımları ayırırken, kütle spektrometrisi, her bir ayrılmış bileşenin tanımlanmasına (veya şüphelenilen kimliğinin doğrulanmasına) yardımcı olabilecek spektral bilgiler sağlar. MS yalnızca hassas olmakla kalmaz, aynı zamanda seçici tespit sağlayarak tam kromatografik ayırma ihtiyacını ortadan kaldırır.
LC-MS, geniş bir kimyasal yelpazesini iyi bir şekilde kapsadığı için metabolomik için de uygundur. Bu tandem tekniği, çevresel ve biyolojik kökenli karmaşık örneklerde yaygın olarak bulunan biyokimyasal, organik ve inorganik bileşikleri analiz etmek için kullanılabilir. Bu nedenle, LC-MS biyoteknoloji, çevre izleme, gıda işleme ve ilaç, tarım kimyasalları ve kozmetik endüstrileri dahil olmak üzere çok çeşitli sektörlerde uygulanabilir. 2000'lerin başından bu yana, LC-MS (veya daha spesifik olarak LC-MS-MS) klinik uygulamalarda da kullanılmaya başlandı.
Özellikleri Sıvı Kromatografisi-Kütle Spektrometresi
- Hızlı analiz ve akış için minimum numune hazırlama gereklidir
- Birden fazla bileşiği, hatta bileşik sınıflarını bile analiz etme yeteneğiyle birleşen yüksek hassasiyet.
- Hedef analitlerin yüksek doğrulukta, yüksek çözünürlükte tanımlanması ve kantifikasyonu.
Sıvı Kromatografisi-Kütle Spektrometrisinin Uygulamaları
MS'nin LC sistemleriyle birleştirilmesi çekicidir çünkü sıvı kromatografisi, kimyasal bileşiminin iyi belirlenmesi gereken hassas ve karmaşık doğal karışımları ayırabilir (örneğin, biyolojik sıvılar, çevresel örnekler ve ilaçlar). Ayrıca, LC-MS'nin uçucu patlayıcı kalıntı analizinde uygulamaları vardır. Günümüzde, LC-MS en yaygın kullanılan kimyasal analiz tekniklerinden biri haline gelmiştir çünkü doğal kimyasal bileşiklerin %85'inden fazlası polar ve termal olarak kararsızdır ve GC-MS bu örnekleri işleyemez. Örneğin, HPLC-MS, proteomik ve ilaç laboratuvarları için önde gelen analitik teknik olarak kabul edilir. LC-MS'nin diğer önemli uygulamaları arasında gıda, pestisit ve bitki fenollerinin analizi yer alır.
1. Farmakokinetik
LC-MS, biyoanaliz alanında yaygın olarak kullanılır ve özellikle ilaçların farmakokinetik çalışmalarında yer alır. Bir ilacın vücut organlarından ve hepatik kan akışından ne kadar çabuk temizleneceğini belirlemek için farmakokinetik çalışmalara ihtiyaç vardır. MS analizörleri, daha kısa analiz süreleri ve HPLC sistemlerine yaygın olarak takılan UV dedektörlerine kıyasla daha yüksek duyarlılık ve özgüllükleri nedeniyle bu çalışmalarda faydalıdır. En büyük avantajlardan biri, dedektörün parçalanacak belirli iyonları seçmek üzere programlanabildiği tandem MS-MS'nin kullanılmasıdır. Ölçülen miktar, operatör tarafından seçilen molekül parçalarının toplamıdır. LC-MS'de herhangi bir girişim veya iyon baskılaması olmadığı sürece, LC ayrımı oldukça hızlı olabilir.
2. Proteomik/Metabolomik
LC-MS, proteomikte karmaşık bir karışımın bileşenlerini tespit etmek ve tanımlamak için bir yöntem olarak kullanılır. Aşağıdan yukarıya proteomik LC-MS yaklaşımı genellikle proteaz sindirimi ve proteaz olarak tripsin, üçüncül yapıyı denatüre etmek için üre ve sistein kalıntılarını değiştirmek için iyodoasetamid kullanılarak denatürasyonu içerir. Sindirimden sonra, LC-MS peptit kütle parmak izi için kullanılır veya LC-MS/MS (tandem MS), tek tek peptitlerin dizilerini türetmek için kullanılır. LC-MS/MS, peptit kütlelerinin yüksek çözünürlüklü bir kütle spektrometrisiyle bile örtüşebileceği karmaşık örneklerin proteomik analizi için en yaygın olarak kullanılır. Karmaşık biyolojik örnekler (örneğin, insan serumu) 1000'den fazla proteini tanımlayabilen modern LC-MS/MS sistemlerinde analiz edilebilir. Ancak, bu yüksek düzeyde protein tanımlaması yalnızca örneği SDS-PAGE jeli veya HPLC-SCX yoluyla ayırdıktan sonra mümkündür. Son zamanlarda, LC-MS/MS peptit biyobelirteçlerini aramak için uygulanmıştır. Örnekler arasında dört ana bakteriyel solunum yolu patojeni (Staphylococcus aureus, Moraxella catarrhalis; Haemophilus influenzae ve Streptococcus pneumoniae) ve SARS-CoV-2 virüsü için peptit biyobelirteçlerinin yakın zamanda keşfi ve doğrulanması yer almaktadır.
LC-MS, biyolojik dokuların (örneğin, kan plazması, serum, idrar) küresel metabolit profillemesinde en yaygın kullanılan tekniklerden biri olarak ortaya çıkmıştır. LC-MS ayrıca doğal ürünlerin analizi ve bitkilerdeki ikincil metabolitlerin profillenmesi için de kullanılır. Bu bağlamda, MS tabanlı sistemler karmaşık biyolojik örneklerden geniş spektrumlu bileşikler hakkında daha ayrıntılı bilgi edinmek için yararlıdır. LC-nükleer manyetik rezonans (NMR) da bitki metabolomiklerinde kullanılır, ancak bu teknik yalnızca en bol bulunan metabolitleri tespit edebilir ve ölçebilir. LC-MS, bitki sistemini moleküler düzeyde inceleyerek bitki metabolomunun çevresine verdiği tepkiye göre tarafsız bir karakterizasyon sağlamayı amaçlayan bitki metabolomikleri alanını ilerletmek için yararlı olmuştur. LC-MS'nin bitki metabolomisindeki ilk uygulaması, Cucurbita maxima floem dokularından çok çeşitli yüksek polariteli metabolitlerin, oligosakkaritlerin, amino asitlerin, amino şekerlerin ve şeker nükleotidlerinin tespitiydi. LC-MS'in bitki metabolizmasındaki bir diğer örneği ise Arabidopsis thaliana'nın yaprak ekstraktlarından glikoz, sakaroz, rafinoz, stakiyoz ve verbaskozun etkin bir şekilde ayrılması ve tanımlanmasıdır.
3. İlaç Geliştirme
LC-MS, hızlı moleküler ağırlık onayı ve yapı tanımlaması sağladığı için ilaç geliştirmede sıklıkla kullanılır. Bu özellikler, potansiyel uygulamaya sahip çok çeşitli ürünlerden başlayarak bir keşfin oluşturulması, test edilmesi ve doğrulanması sürecini hızlandırır. İlaç geliştirme için LC-MS uygulamaları, peptit haritalama, glikoprotein haritalama, lipodomics, doğal ürünlerin replikasyonunun giderilmesi, biyoafinite taraması, in vivo ilaç taraması, metabolik stabilite taraması, metabolit tanımlaması, safsızlık tanımlaması, kantitatif biyoanaliz ve kalite kontrolü için kullanılan son derece otomatik yöntemlerdir.
Neden bizi seçmelisiniz?
"Birden fazla tedarikçi" tedarik sürecinde her zaman bir sorun olmuştur. Drawell, tek elden laboratuvar ekipmanı ve bilimsel aletler tedarikçisi olarak bu sorunu mükemmel bir şekilde çözebilir. Kendi ekipmanımızı üretmenin yanı sıra, diğer laboratuvar ekipmanlarını da temsil ediyoruz. Ürün yelpazemiz, rekabetçi fiyatlarla zengin ve çeşitlidir. Müşterilere tek elden hizmet sağlayın.
Kullanıcı Eğitimi – Drawell'in yetenekli mühendisleri tarafından kurulum, hata ayıklama testleri, teknik servisler vb. hakkında eğitim. Çin'deki fabrikamızda veya müşterilerin ülkesindeki sahada gerçekleşebilir. Maliyet, eğitimin nerede ve ne zaman gerçekleştiğine bağlıdır.
Sorunu tartışmak ve çözmek için çevrimiçi sohbetler, gerçek zamanlı görüntülü görüşmeler ve uzaktan rehberlik. Satış sonrası aşama için çevrimiçi teknik rehberliğimiz ücretsizdir ve sonsuza kadar hazırdır.
Kaliteden kaynaklanan hasarlı parçaların onarımı ve seçili parçaların değiştirilmesi dahil olmak üzere 1 yıl ücretsiz resmi garanti (kargo ücreti ekstradır). Resmi garanti süresi bitmeden garantiyi uzatmak için ürün fiyatının %5'i tahsil edilir.