kromatografi bir karışımın bileşenlerini ayırmak ve tanımlamak için yaygın bir analitik tekniktir. Genellikle karmaşık karışımları incelemek ve kimya, biyoloji ve tıp gibi alanlarda belirli bileşenleri tanımlamak için kullanılır. Bu makale şu konulara odaklanmaktadır: Kromatografi nasıl çalışır.
Bir Prensibi kromatografi
Kromatografi, farklı bölümleme ilkesine göre çalışır, bir karışımın bileşenlerinin sabit bir fazla ve hareketli bir fazla etkileşimlerine bağlı olarak ayrıldığını belirtir. Sabit faz genellikle bir kolonda hareketsizleştirilmiş bir katı veya sıvıdır, hareketli faz ise kolonda hareket eden bir sıvı veya gazdır.
Kromatografinin Genel Türleri
Gaz kromatografisi (GC), sıvı kromatografisi (LC) ve iyon kromatografisi (IC) en yaygın üç kromatografi türüdür. Her kromatografi formunun kendine özgü bir durağan fazı ve hareketli fazı olmasına rağmen, diferansiyel bölümlemenin altında yatan fikir aynı kalır.
Sabit faz gaz kromatografisi uzun, ince bir kolonun içine kaplanmış katı bir maddedir, hareketli faz ise kolondan geçen bir gazdır. Sabit faz, kolondan geçerken gazla etkileşime girerek karışımın bileşenlerini sabit faz ve hareketli faza olan yakınlıklarına göre ayırır. Ayrılan bileşenler kolonun sonunda bulunan bir dedektör tarafından tespit edilir ve tutulma sürelerine göre tanımlanabilir.
Sabit faz sıvı kromatografisi bir kolona doldurulmuş sıvı veya katı bir maddedir, oysa hareketli faz kolonda hareket eden bir sıvıdır. Numune karışımı kolona enjekte edilir ve bileşenler sabit ve hareketli fazlara olan farklı yakınlıklarına göre ayrılır. Kolonun sonunda bulunan bir dedektör, tutulma sürelerine göre tanımlanabilen ayrılmış bileşenleri algılar.
Sabit faz iyon kromatografisi bir kolona paketlenmiş yüklü bir reçine iken, hareketli faz kolondan geçen bir sıvıdır. Numune kombinasyonunu kolona enjekte ettikten sonra, karışımın bileşenleri yüklü sabit faz ve hareketli faz ile olan farklı etkileşimlerine göre ayrılır. Kolonun sonunda bulunan bir dedektör, tutulma sürelerine göre tanımlanabilen ayrılmış bileşenleri algılar.
Kromatografinin Bileşenleri
Kromatografi kurulumunun özel bileşenleri kullanılan kromatografi türüne bağlı olarak değişse de, kromatografi sistemlerinin çoğunda ortak olan birkaç temel bileşen vardır.
Sütun
Kolon, kromatografi sisteminin kalbidir ve bileşenlerin ayrıldığı yerdir. Sabit faz genellikle uzun, silindirik bir tüpte bulunur. Kolonun boyutu ve şekli, kromatografi türüne ve uygulamaya göre farklılık gösterebilir.
Durağan faz
Sabit faz, kolonda hareketsizleştirilmiş ve katı veya sıvı olan bir maddedir. Numune karışımıyla etkileşime girer ve bileşenlerini sabit ve hareketli fazlara olan yakınlıklarına göre ayırır. Silika jel, alümina ve iyon değişim reçineleri sabit fazların örnekleridir.
Mobil aşama
Mobil faz, kolondan akan ve numune karışımını taşıyan bir sıvı veya gazdır. Sabit faz ile etkileşime girer ve karışımın bileşenlerini sabit faz ve mobil faz ile farklı etkileşimlerine göre ayırır. Mobil faz örnekleri arasında çözücüler, gazlar ve elektrolit çözeltileri bulunur.
enjektör
Enjektör, numune karışımını kromatografik aparata sokmaktan sorumludur. Genellikle, kolona hassas miktarda numune enjekte etmek için kullanılan bir şırıngadan veya bir valften oluşur.
Detektör
Örnek karışımının ayrılmış bileşenleri kolondan ayrılırken, dedektör bunları algılar. Kullanılan dedektör, kromatografi türüne ve uygulamaya göre farklılık gösterebilir. UV-görünür spektrofotometreler, kütle spektrometreleri ve kırılma indisi dedektörleri dedektör örnekleridir.
Veri Toplama Sistemi
Veri toplama sistemi, dedektörün verilerini toplamak ve değerlendirmek için kullanılır. Normalde, ayrılmış bileşenlerin tutulma sürelerini ve tepe bölgelerini analiz edebilen bir bilgisayar ve özel yazılımdan oluşur.
Pompa
Pompa, mobil fazın kolondaki akışını düzenler. Numune bileşenlerinin doğru bir şekilde ayrılması için genellikle hassas bir akış hızına sahip yüksek basınçlı bir pompa kullanılır.
ÖZET
Kromatografi, bir karışımdaki çok çeşitli kimyasalları ayırmak ve tanımlamak için güçlü bir analitik tekniktir. Kromatografinin çok yönlülüğü ve doğruluğu, onu bilimsel çalışma ve endüstride vazgeçilmez bir araç haline getirir.
