Bu makale size bir ışık kaynağının nasıl seçileceğini tanıtacaktır. floresan mikroskop Floresanstan, floresan mikroskobunun etkisini etkileyen faktörler ve floresan mikroskobu için ışık kaynakları.
Floresan Nedir?
Floresan mikroskobu, biyoteknoloji, tıbbi tedavi, mineral keşfi ve diğer alanlarda yaygın olarak kullanılan floresan fenomeni ilkesi kullanılarak geliştirilen bir araçtır. Floresan, fotolüminesansın soğuk bir lüminesans fenomenidir. Belirli bir madde belirli bir dalga boyundaki olay ışığıyla ışınlandığında, madde ışık enerjisini emer ve uyarılmış bir duruma girer ve hemen uyarılmamış hale gelerek ışık biçiminde enerjiyi serbest bırakır.
Belirli bir maddeden uyarılmadan sonra yayılan ışık floresanstır, genellikle giden ışığın dalga boyu gelen ışığın dalga boyundan daha uzundur. Çoğu floresan madde için olay ışığı durdurulduğunda, lüminesans fenomeni de ortadan kalkacaktır. Bu fenomen biyokimyasal tıpta, aydınlatmada ve mineral araştırmalarında yaygın olarak kullanılır.
Floresan Mikroskobunun Görüntüleme Etkisini Etkileyen Faktörler
Son yıllarda, çeşitli yeni floresan boyalar ve çeşitli özel floresan problar ortaya çıktı. Piyasada yüzlerce floresan boya, floresan prob, floresan protein ve diğer malzemeler bulunmaktadır. En iyi floresan tespit etkisini elde etmek için uygun bir floresan mikroskobunun nasıl yapılandırılacağı daha karmaşık bir konu haline geldi.
Birçok floresan faktörü floresan mikroskop görüntülemesini etkiler, esas olarak floresan örneklerinin hazırlanması, floresan ışık kaynağının seçimi, mikroskop objektif lensinin seçimi, floresan filtrelerinin kombinasyon stratejisi (uyartım filtresi, emisyon filtresi, dikroik ayna bölücü filtre, Bant genişliği seçimi), mikroskop kamera seçimi ve diğer konular. Floresansın uyarılması, filtrelenmesi, görüntülenmesi ve söndürülmesi ve floresan deneylerinin ayarlanması, en iyi sonuçları elde etmek için yukarıdaki faktörlerin nasıl koordine edileceğidir. Bunlar arasında görüntüleme etkisini etkileyen çok önemli bir faktör de floresan ışık kaynağıdır.
Floresan Mikroskop Işık Kaynaklarının Türleri ve Tanıtımı
Floresan mikroskoplarında yaygın olarak kullanılan ışık kaynakları genellikle beyaz ışık kaynaklarıdır: yüksek basınçlı cıva lambaları, ksenon lambalar, metal halide lambalar ve LED beyaz ışık kaynaklarının yanı sıra üst düzey LED tek dalga boylu ışık kaynakları.
1. Cıva Lambası
Kuvars camdan yapılmış ultra yüksek basınçlı cıva lambası (100W), ortada küresel bir şekle sahiptir ve belirli miktarda cıva ile doludur. Çalışırken, iki elektrot arasında boşaltılır, cıvanın buharlaşmasına neden olur ve topun içindeki hava basıncı hızla yükselir. Cıva tamamen buharlaştığında, 50-70 standart atmosfer basıncına ulaşabilir ve bu işlem genellikle yaklaşık 5-15 dakika sürer.
Ultra yüksek basınçlı cıva lambasının lüminesansı, elektrotlar arasındaki deşarjla cıva moleküllerinin sürekli ayrışması ve indirgenmesi sırasında ışık kuantalarının emisyonunun sonucudur. Çeşitli floresan maddeleri uyarmaya yetecek kadar güçlü ultraviyole ve mavi-mor ışık yayar. Bu nedenle, floresan mikroskoplarında yaygın olarak kullanılan ana akım ışık kaynağıdır. Ancak, ultra yüksek basınçlı saray fenerlerinin hizmet ömrü nispeten kısadır, genellikle 1000 saatten azdır ve ampulü değiştirme maliyeti yüksektir. Cıva lambasının kontrol edilebilirliği zayıftır.
2. Ksenon Lamba
Beyaz ışık kaynakları olarak ksenon lambalar ve cıva lambaları, ultraviyoleden yakın kızılötesine kadar bir dizi dalga boyu ışık sağlayabilir, ancak farklı uyarım spektrumlarına sahiptirler. Cıva lambaları yakın ultraviyole, mavi ve yeşil ışığa odaklanır ve tepedeki bu yüksek uyarım enerjisi parlak bir floresan sinyali sağlar ancak çok fototoksiktir. Bu nedenle, sabit numuneleri veya zayıf floresansı görüntülemek için ultra yüksek basınçlı cıva lambaları kullanılır. Buna karşılık, ksenon lamba ışık kaynağının uyarımı nispeten naziktir ve bu, farklı dalga boylarının yoğunluğunu karşılaştırmak için kullanılabilir. Ksenon lambanın güçlü uyarımı yakın kızılötesi 800-1000 nm'dedir.
Xenon lambanın ultra yüksek basınca göre özellikleri:
- Spektral yoğunluk dağılımı ve gün ışığı daha homojene yakındır.
- Kızılötesi ve orta kızılötesinde hala güçlü bir spektral yoğunluk var.
- Ömrü cıvalı lambalara göre biraz daha uzun olup 1200 saate kadar çıkabilmektedir.
- Lamba, kararlı bir çıkışa ulaşmak için hızlı bir şekilde ateşlenir, daha az başlangıç süresine sahiptir ve lamba söndükten sonra yeniden ateşlenebilir.
3. Metal Halide Lamba
Günümüzde mikroskop markaları tarafından yaygın olarak kullanılan bir ışık kaynağıdır. Uyarım spektrumu bir cıva lambasınınkine çok benzerdir, ancak mikroskoba ısıyı dağıtabilen ve 2000 saate ulaşabilen daha uzun bir ömre sahip olabilen bir optik fiber ile bağlanır. Işık kaynağı, ışığın ürettiği ısı enerjisini büyük ölçüde azaltabilen bir optik fiber aracılığıyla mikroskoba bağlanır. Canlı hücre görüntüleme için metal halide lambaların bir diğer avantajı da uyarım ışık yoğunluğunun kolayca ayarlanabilmesidir.
4. LED Beyaz Işık Floresan Işık Kaynağı
LED ışık kaynağının geçişi milisaniyeler içinde gerçekleşir, bu da numunenin ışığa maruz kalma süresini azaltır ve ömrünü uzatır. Ayrıca, LED ışığının zayıflaması hızlı ve hassastır, bu da uzun vadeli canlı hücre deneylerinde fototoksisiteyi büyük ölçüde azaltabilir. Diğer ışık kaynaklarıyla karşılaştırıldığında, LED ışık kaynakları yalnızca daha dar bir spektrumda uyarır ve çoklu LED bantları LED ışık kaynaklarını çok renkli floresan görüntüleme uygulamaları için uygun hale getirir.
Son yıllarda hızla geliştirilen bir floresan mikroskop aydınlatma kaynağı olan yüksek güçlü LED floresan ışık kaynağı, diğer ışık kaynaklarına kıyasla belirgin performans avantajlarına ve maliyet avantajlarına sahiptir. Ultra yüksek basınçlı cıva lambalarının, ksenon lambalarının ve metal halide lambalarının yerini yavaş yavaş alacak ve floresan mikroskoplarının ana akımı haline gelecektir. floresan aydınlatma kaynağı.
